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1.亚硝酸钠和钠的区别

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三、现代广告形式由于先进技术和媒介的出现，现代广告在继承古代广告形式的基础上，有了长足的进步。先进的媒介，精湛的制作技术，创造了许多高效率的广告形式，其传播范围、速度、对象和传播方式都远比古代的广告要宽阔、迅速、广泛和高超得多。（一）报纸广告报纸广告是现代广告的重要形式，它的出现是在近代的事情，比报纸的出现要晚。在我国1200多年前的唐初，便有最早的官报《邸报》，据认为是世界上最早的报纸。《邸报》在宋朝开始定期出版发行，明朝开始用活字排版。清朝时《邸报》更名为《京报》。这份报纸只在宫廷和官僚之间传阅，不对外发行，也不准刊登广告。在我国出现报纸广告是在战争后。1840年第一次　战争失败后，上海等五个城市被辟为通商口岸，外国“洋货”大量通过口岸城市向内地倾销，洋人也开始在口岸城市投资设厂。在此情况下，报纸广告便开始在上海等地大量涌现。外国人开始在中国办报，从南扩展到北方，在半个多世纪中先后创办了300余份报纸，多用中文出版。主要的报纸有《上海新报》、《万国公报》、《申报》、《新闻报》等，当时这些报纸主要刊登船期广告和市场行情、货物广告，其目的都是为了推销舶来商品和劳务服务，沟通中外商业行情。　19世纪末，我国开始出现民族资产阶级办的报纸，用来刊登国货广告，和外商“商战”。这些报纸有1873年创办于汉口的《昭文新报》、1874年创办于香港的《循环日报》、创办于上海的《汇报》，它们大都刊登很多广告。1907年清朝末年创刊的《政治官报》也允许登商业广告，并制定了广告章程，随后出现的许多新办报纸也都刊登广告，提倡国货。　在17世纪的欧洲，由于第一次工业革命的兴起，工商业变得较为发达，报纸广告也得以发展。英国最早的报纸《伦敦周报》在1622年开始发行，三年后开始刊出广告。1625年《英国信使报》刊出一则图书出版广告，1650年《新闻周报》刊出了寻马悬赏启示，都被认为是英国最早的报纸广告。美国独立前，第一家报纸《波士顿新闻通讯》在1704年创刊时刊登了一则向广告商推荐报纸作为宣传媒介的广告。美国广告之父本杰明?富兰克林于1729年创办《宾西法尼亚日报》，在创刊号的头版上刊出了一则肥皂广告，不久，这份报纸的发行量和广告量都跃居首位。到1820年时，美国已拥有报纸532家，都用相当版面刊登广告。（二）杂志广告最早的杂志广告出于何时，由于史料缺乏，目前尚难肯定。1710年英国《观察家》杂志曾经刊登过茶叶、咖啡、巧克力的广告和拍卖物品、房产、书刊及成药的广告，相信杂志广告的出现肯定在这以前。美国的杂志多出版于18世纪初叶，这些早年出版的杂志只是一些小册子，多数不刊登广告。直到19世纪中叶美国经济开始走向繁荣，杂志广告才逐步发展。第一家中文杂志是1815年8月在马来亚的马六甲创办的《察世俗每月统计传》，而第一家在我国境内出版的中文杂志则是于1833年在广州创办的《东西洋考每月统计传》月刊，内容有社会新闻、宗教、政治、科学和商业动态等。这些杂志均刊出中文广告。“五四”运动前后，各种刊物纷纷面世，也大多刊登广告，作为解决经费来源和改善员工生活的措施。（三）广播广告广播广告主要指无线电台和有线电台的商业广告。1844年美国工程师塞缪尔?莫尔斯发明了电报，次年即用来传递新闻。1906年世界上第一座广播电台在美国建立，开始播音。　1922年美国创建了第一座商业无线电台，正式开展商业广告播放。1924年美国人埃尔创建了第一个无线电联播网，开展大规模商业广告活动；到1928年时，通过无线电广播广告的费用即已达到1050万元。我国于1922年开始创办电台，但电台正式开展广告活动则是在1927年开始。（四）电视广告电视广告是广告中的后起之秀，它兼有报纸、广播和**的视听功能。世界上最早的电视台于1929年在英国试播，1936年正式建成开播。美国在1941年才开始播放商业广告。电视的大规模商业化是发生在第二次世界大战后的事，电视广告在西方已成为举足轻重的广告形式。我国于1958年建成第一座电视台，13年开始试播彩色电视，而在19年12月才开播商品广告。　报纸、杂志、广播和电视等广告形式被称为四大媒体广告，其广告费用占整个广告市场的广告费用的绝大部分。据美国1983年的统计，四大媒体广告收入的百分别为：报纸13．4％，杂志19．6％，广播6．3％，电视60．7％。　除了四大媒体广告之外，现代广告形式还有：橱窗广告，这是在19世纪末随着百货公司的出现而广泛运用的广告形式；霓虹灯广告，1896年英国化学家拉姆斯发明了霓虹灯后，将其逐渐应用到商业广告中。霓虹灯广告1910年首次出现在法国巴黎，现在已成为户外广告的主要形式；路牌广告，出现于19世纪末，到本世纪20年代已很盛行，至今风行不衰；**广告和幻灯广告，流行于本世纪初，现在还多见；交通广告，是指在汽车、轮船的身上以及码头、车站等处设立的广告牌，日常多见；POP售点广告；礼品广告；包装广告，如购物袋等。由于现代科技的进步，又出现了空中广告。空中广告分飞行广告、书云广告、烟雾广告。飞行广告是用飞机、气球、气艇刷写标语和带动标语等。书云广告是在地面上用抛物线反射器的技术在夜空或暗云上面打字。烟雾广告是飞机喷出的烟来书写广告。这种烟由于加了轻石蜡油等化学剂，能附着于空气微粒上较长时间。此外还有卫星广告、电视报纸、电子广告、激光广告、光纤广告、录像广告、传真广告、电话广告、闭路电视和有线电视等广告媒体。随着科学技术的进步，新的广告媒体将不断出现，广告媒体将会越来越丰富。　　 第三节　广告的功能现代广告业的长足发展和不断进步，其主要原因在于社会化大生产所带来的商品生产和大众多层次的物质需要的高度发达。现代化的社会大生产具有巨大的能量，足以生产数额巨大的商品，同时，由于现代运输技术的发展和国际合作的广泛开展，使流通领域变得广大。正是由于这种社会化大生产所带来的巨大数量的商品生产和销售，产品日新月异，市场竞争异常激烈。商品的丰富，必然使市场从卖方市场向买方市场转变，这是引起竞争的根本原因。产品交易市场变得广阔辽远，地区封闭和地区界限被打破，商品销售国际化。由于市场庞大，生产与消费之间重重相隔，中间流转环节增多，因而商品广告宣传活动就变成了面对某一地区或某一层次的大众，而不是具体的某一名顾客，商品的生产也是为了满足某一地区或某一层次的消费者的共同消费欲求。同时，由于科学技术日益进步，产品种类繁多，新产品日新月异，消费者已难于在购买商品时进行比较选择，而是习惯于凭印象和消费习惯认牌购买，即进入所谓的“印象”交易时代。　由于现代市场的这些特点，要加速商品的社会化大生产的全过程，就必须充分地利用有效的广告宣传，迅速准确地把商品信息及时传播到广大消费者当中，使大量的产品能够快捷地从生产流通转入消费。因此，现代广告业是密切联系生产和消费的桥梁，是市场营销的重要组成部分，也是社会化分工中必不可少的行业。实践证明，广告在社会经济生活中所发挥的作用是不可替代的。一、信息传播功能商业广告是服务于商品流通的，为产品进入消费提供服务，与“物流”（物流：是指商品实体的运动也就是使用价值的运动。）、“商流”（商流：是指商品、货币与所有权的运动或转移，也就是商品价值的运动。）一起共同承担完成商品使用价值的运动和价值交换的全过程。商业广告把有关生产方面的信息传递给消费者，向消费者提供商品或劳务信息，这就是广告的信息传播功能。　由于新的科学技术在社会化大生产中的广泛应用，现代社会商品的流向往往是分正反两个方面同时进行的。反向的从消费市场得来的消费者的需求信息，首先传递给生产者，而后，再把生产者的有关产品信息正向传递给消费者，自此周而复始，循环不已，而现代广告活动，则是正式从市场调查入手以广告后的市场信息反馈为终的这样一个全过程。因此，广告对于生产者来说，是了解市场信息的渠道，而对消费者来说，则是商品信息的来源。　另一方面，从信息流的角度来考查，广告既为物流、商流服务，同时，也对物流和商流起到一定的指导作用。商品从生产领域达到消费领域的顺利流通是有条件的，即必须在数量上质量上和时间、地点以及具体的消费对象（消费单位和消费者）等诸方面均要顺利接口，密切衔接；而商品的供需又通过价格竞争即价格规律对商品生产自发地起着调节作用。广告活动所提供的信息流，可以通过正确的市场调查和科学的预测提供依据，减少商品生产的盲目性，同时，广告宣传还可以疏通物流和商流渠道，缩短流通时间，刺激消费需求，提高商流的时间效益，在一定程度上促使商品经济繁荣。　新技术在广告业的广泛应用，使商业广告的信息功能的范围不断扩大。目前广泛出现的国际广告公司，开展国际市场的广告业务经营，它们利用通讯卫星、电脑处理机、传真设备等，通过“连线系统”作业，密切注视着国际市场的商品信息动态，同各方人士有着密切的联系。新科技革命的演进所带来的世界信息产业的发展过程，亦是人类超自然空间手段完善、广告业迈向全球的过程。随着电脑技术、计算机技术、通信技术的进一步普及和发展，广告的信息传递功能将进一步发展和强化，发挥更高的效能。例如，由于电道的数量增加，不同频道可将节目的重点集中于特定的对象；　而报纸出版商可以运用计算机同时制成不同内容的多页广告，每页针对不同的读者；“电子报纸”的出现，则可以通过广播、闭路电视节目或传真设备把报纸广告送到人们各自的家中；杂志的个体化可为顾客提供自己所需要的广告服务；直接邮寄广告可通过计算机掌握各阶层人们的需求，同时还可以把各种广告资料准确无误地邮寄给可能对销售作出反应的人。与此相似，消费者也可以通过传真电话等现代设备，向超级市场选购所需的产品。可以预料，在不久的将来，广告业的信息功能还将不断地得到强化，广告机构将与商情调研机构和市场预测机构融为一体，为社会商业经济生活提供更完美的服务。二、指导消费的功能认识商品是购买产品的前提，只有加深了对商品的认识，才有可能激发起购买兴趣和购买欲望。特别是在现在商品市场中，由于科学技术的突飞猛进，新产品日新月异，商品种类繁多，各类商品的功能各异，同时，许多商品都分散在各个商业网点，消费者迫切需要了解商品的性能和产、供、销情况。广告通过对商品信息的有效传播，向消费者介绍商品的厂牌、商标、性能、规格、用途特点、价格，以及如何使用、保养和各项商业服务措施，这实际上是在帮助消费者提高对商品的认识程度，指导消费者如何购买商品。尤其是新上市产品，广告的消费指导尤为重要。　暨南大学商学系在1982年的一次广告调查中所获资料表明，北京、广州两市的干部职工在回答抽样调查问卷时，回答广告对商品选购有帮助者占17．4％，稍有帮助者占44．5％，没有帮助的占22．8％，态度不明确者占15．3％。从调查结果可以看出，认为广告对选购商品有帮助的或稍有帮助的合计占61．9％。这还是在我国广告刚刚起步，广告活动相对较少、广告水平相对较低的年代时的情况。现在，由于广告技术的发展，广告水平不断提高，广告规模也不断扩大，我们相信对广告的消费指导作用取信任态度的已远不止这个数。　广告对消费者购买行为的影响，不仅是起一般的让消费者认识商品的作用，更重要的是广告在指导消费的同时，还有刺激消费需求的作用。广告的连续出现，就是对消费者的消费兴趣与欲求的不断刺激过程。　广告刺激需求包括两方面的内容：初级需求和选择性消费。初级需求是指对某类商品的需求。新产品进入市场后，多数运用广告来刺激初级需求，如19年及其以后的十年内电视机市场的变化。刚开始是黑白电视机的上市，厂家通过广告宣传，介绍该产品的视听兼具的优越性；晚些时候，彩色电视机上市，广告则通过突出宣传彩色电视机的逼真效果和清晰图象来刺激消费者的初级消费欲求，从而使消费者的消费欲求发生转移。随后出现的电脑选台彩色电视机、电脑遥控彩色电视机和平面直角遥控彩色电视机的上市，也基本上根据其产品各自的特色，进行了旨在刺激消费者的初级消费欲求的广告宣传。选择性需求（消费）是指对特定商品牌子的需求，这是在初级需求形成后的进一步发展。广告通过介绍某一牌子商品的优点和有别于其他同类产品的特色，从而刺激选择性需求，引导消费者认牌购买。　广告在指导消费、刺激需求方面，还起着创造流行时尚的作用。许多流行性商品的出现，是与广告的大肆渲染分不开的；消费者的消费习惯，也会受到广告的影响而改变，接受新的消费观念，雀巢咖啡的流行就是一例。　广告的消费指导作用，为人们提供了丰富的商品信息，介绍了各类商品的质量特点，提供了劳务服务，从而使人们及时地购买到自己所需要的商品或劳务，丰富人们的物质文化生活，节约购买时间，使人们有更多的时间从事工作、学习和，为广大消费者的生活提供了方便。三、沟通产销渠道、促进商品销售的功能在现代化的社会化大生产中，生产和流通是统一的生产过程中的两个相辅相成的要素。企业生产出来的产品，只有通过流通领域才能够进入消费，实现其使用价值。广告在沟通产销渠道、疏通产供销关系上，起着桥梁作用。市场经济的发展，已经完全打破了地域界线，整个市场变得完全开放，流通渠道增多而流通环节相对变少，地不分南北，人无论中西，都在市场经济中生活。现在的广告已成为工商企业加速商品流通和扩大商品销售的有效工具，被誉为“运用先进媒体的超级推销巨人”。另外、还得强调一点，马克思曾经强调过：“在商品生产上，流通和生产一样重要，从而流通当事人和生产当事人一样必要。”由此可见广告对加速流通的重要性。　广告宣传的推销作用，首先是从引起消费者的注意开始的，进而诱发他们对商品的兴趣，激起他们的购买欲望，促成购买行为。连续不断的广告宣传，可以使潜在的购买者实现购买，从而使商品增加销售。而在新的市场上开展广告宣传，则可以开辟新的销路，使产品销量激增。内蒙古自治区包头绝缘材料厂处于边远地区，其生产的绝缘材料虽然产品质量在国内已达先进水平，但由于信息不畅，销售渠道不通，产品总是难以销售，造成积压。1981年以来，他们了广告宣传活动，先后在全国13个省市作了广告，并取邮寄广告方式把产品目录邮寄到各地需用绝缘材料的单位，同时在中国国际贸易杂志、中国机械设备季刊登了广告，从而开拓了国内国际市场，实现了产品的顺利销售，获得较好的经济效益。　我国幅员辽阔，人口众多，是一个相当广阔的消费市场。由于社会经济欠发达，目前不少地区还处于交通不便、经济信息传播不及时的状况，因此，广告宣传对于沟通城乡市场、加速商品流通就有十分重要的意义。广告的作用，不仅在于巩固市场，提高市场占有份额，而且还能在创造需求的基础上，开辟新的市场。四、鼓励竞争、促进生产经营与管理的功能由于广告宣传活动具有明确的针对性诉求，并且需要对广大消费者进行说服，因此，在广告活动中，就必须明确地宣传产品的生产厂家、牌号、商标等，同时还必须充分强调所宣传的产品的特点和优于同类产品之处，以激发消费者的注意和兴趣，促成消费者认牌购买。这样，广告宣传就成了企业之间开展产品竞争、争夺市场的手段，同时，也刺激和促进了生产厂家或劳务服务性企业提高生产能力，改善经营管理。　广告对企业的促进作用，首先在于促进产品质量的提高。由于广告宣传可以收集到用户和消费者的意见，从而要求企业生产出适销对路、品质优良的产品，创造出各种优质名牌产品，以提高市场占有率。因此，产品的质量就成了企业今后在产品市场争夺中决定其胜负存亡的关键。商品生产的发展，必然会引起竞争。在新产品日益增多、特别是同类产品增多的情况下，市场竞争达到白热化的程度。这就迫使企业在提高产品质量上做文章，在新的功能产品开发上做文章。　在企业产品质量达到相当高水平之后，企业为了扩大其产品的市场占有份额或开辟新的产品市场，以获取更大的经济利益，就势必扩大企业的生产规模，提高生产能力。这是对产品进行广告宣传给生产企业带来的第二个好处。社会再生产过程是生产和流通过程的统一。生产决定流通，但分配、交换和消费又反过来决定生产。对扩大再生产更是如此。企业生产的产品在市场立足，并不意味着企业取得了最佳的经济效益，而只有在企业达到规模经营之后，企业的经济效益核算指标——投入产出比率才会相对较佳。因此，企业通过市场竞争来提高企业自身的生产能力，发展企业的生产规模，就成为企业增强其市场竞争能力、提高产品的市场占有份额、开拓新的产品销售市场的必由之路。　同时，由于价值规律的调节作用，使得价值因素在同类产品进行市场争夺时也成为决定企业成败的决定性因素之一。因此，为了提高产品竞争力，就必须使产品有一个合理的竞争价格，而要达到这一点，唯一的可行途径是通过改善企业的经营管理来降低商品的生产和流通成本。这样，广告宣传的竞争，就成了促进企业改善经营管理的有效手段。　竞争是一种压力，工商企业在市场竞争中为了处于不败之地，就必须处处维护自己的信誉，保持并不断提高产品质量，努力开发新产品，提高生产能力，提高服务层次，加强企业与消费者的良好关系。这一切都必须通过改善企业的经营管理来实现。在市场竞争中，广告不仅是企业产品的宣传书，而且是企业的保证书，同时，还是企业给生产同类产品的其他企业的挑战书。企业所登的广告，本身是企业向社会大众提出的保证书，而其他企业的广告则是对本企业的挑战。 五、传授新知识、新技术的功能现代经济生活中，任何一件新产品的生产上布，都是应用现代化科学技术的结果。据信，柯达彩色胶片公司一年投入的新产品研制费用就达数百亿美元。因此，每当新产品上市，就必须通过广告向广大消费者宣讲新产品的性能、质量、工作原理以及使用方法等涉及科学技术进步的新知识和新技术。这样，广告就有意识地承担起了一部分新知识和新技术的社会教育功能，向广大消费者传授科技领域的新知识、新发明和新创造，而这些都有利于开拓广大人民群众的视野，活跃他们的思想，丰富他们的物质和文化生活。

亚硝酸钠和钠的区别

由于各种所需要的营养不同，所以培养基的种类很多。据估计目前约有数千种不同的培养基，这些培养基可根据所含成分、物理状态、以及不同的使用目的等而分成若干类型。

1.按照培养基的成分来分

培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。

(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。

(2)天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被用。

(3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。

2.按照培养基的物理状态分

培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。

(1)固体培养基。是在培养基中加入凝固剂，有琼脂、明胶、硅胶等。固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。

(2)液体培养基。液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，适于作生理等研究，由于发酵率高，操作方便，也常用于发酵工业。

(3)半固体培养基。是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。

3.按照微生物的种类分

培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类。

常用的细菌培养基有营养肉汤和营养琼脂培养基；常用的放线菌培养基为高氏1号培养基；常用的酵母菌培养基有马铃薯蔗糖培养基和麦芽汁培养基；常用的霉菌培养基有马铃薯蔗糖培养基、豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）琼脂培养基和察氏培养基等。

4.按照培养基用途分

培养基按其特殊用途可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基。

(1)加富培养基。是在培养基中加入血、血清、动植物组织提取液，用以培养要求比较苛刻的某些微生物。

(2)选择性培养基。是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。

(3)鉴别培养基。是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物。

营养琼脂（普通琼脂）

成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤） 100毫升

琼脂（视天气，琼脂质量而定）

制法：将上物加热溶解，补足水，调ph至7．6，过滤分装121℃，高压灭菌15分钟。

用途：作普通琼脂平皿。

血琼脂平板（BA）

制法：取营养琼脂（PH7．6），加热使其溶解待冷至45-50℃，以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀，立即倾注于平板或分装试管，制成斜面备用。

用途：1． 一般棉拭子均接种此培养基。

2．尿液，脓液

3．分离细菌标本用。

基础培养基 （肉膏汤BB）

成份：蛋白胨 10克 牛肉膏 5克

氯化钠 5克 水 1000毫升

制法：将以上各物称好，加水煮沸溶解，用1NNOH校正PH至7．6，过滤分瓶，121℃高压灭菌，20分钟备用。

用途：1 作耐药试验，增菌用分装小管。

2 作普通琼脂斜面。

血液培养基（大管肉汤培养基）

成份：1 新鲜牛肉浸液 1000毫升

2 PABA（对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕） 1g% 1毫升

3 MgSO4 [相当于0．493/100毫升] 49．3% 1毫升

4 枸椽酸钠 0．3g

制法：1 将1号，4号混合液，2号，3号液分装高压灭菌。

2 取灭菌1，4号混合液用无菌法加入PABA，MgSO4，再分管，行无菌试验三天方可使用。

用途：作血，骨髓培养用。

肠道杆菌培养基（伊红美兰琼脂）

成份： 蛋白胨 10克 乳糖 10克

氯化钠 5克 琼脂 25（22）克

水 1000毫升 2%伊红溶液20毫升

0．5%美兰溶液 20毫升

制法：将蛋白胨，氯化钠琼脂称好，加水1000毫升使溶解，校正PH7．4过滤，补足失水，加入2%伊红溶液20毫升，0．5%美兰溶液20毫升，（115℃高压20分钟），冷却至50℃左右倾注平板，凝固后存冰箱备用。（高压以后方可再加乳糖）

用途：用作分离沙门氏，志贺氏菌属，也作菌群调查。

罗文斯坦培养基

成份：磷酸二氢钾 2．4克 硫酸镁 0．24克

枸椽酸钠 0．6克 天门冬素 3．6克

纯甘油（丙三醇） 12毫升 水 600毫升

马铃薯粉 30克 鸡蛋 1000毫升（约3公斤）

2%孔雀绿水溶液 20毫升

制法：1 除鸡蛋外（还有孔雀绿）。可将其它物品称好，放入大三角瓶包扎好，高压灭菌。

2 鸡蛋用75%酒精泡30分钟，灭菌法打蛋，倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。

3 将各成份按比例配好，分装每管约5毫升。

4 间歇灭菌第一次90℃1小时，第二次80℃半小时，第三次80℃半小时（或放85℃烤箱内连续二次）。

质控标准： 1 灭菌试验合格。

2 接种结核杆菌要求两星期生长良好。

用途：作结核分枝杆菌培养用。

结核半固体培养基

成份：磷酸氢二钠 19克 硫酸镁 0．6克

磷酸二氢钾 2．5克 天门冬素 5克

1%孔雀绿 1．5克 甘油 20毫升

吐温80（10%） 5毫升 水 1000毫升

枸椽酸钠 2．5克 动物血清 100毫升

琼脂 1．5克（80小时用甲醇去脂）

1%孔雀绿 0．78毫升 吐温80（10%） 5毫升

加动物血清 100毫升

制法： 1 除血清外将上述药品均称好，放入煮沸溶解，调PH7。2

2 分管（每管约10毫升）包扎好，高压，121℃半小时灭菌。

3 待冷后无菌法加无菌血清（绵羊血或兔血）每管约1毫升备用。

2 临床微生物培养基手册

4 去除琼脂方法：取琼脂若干或于三角烧瓶中加甲醇于琼脂1毫升用塞密封，放37℃温浴80小时，每天摇动一次，冷却后到时取出用滤纸过滤，待琼脂自然冷却后备用。

质控标准：1无菌实验合格。

2琼脂硬度合适而清亮。

3接种标准结核杆菌用，强度合适即可用。

用途：培养结核杆菌用。

亚碲酸钾血琼脂平板

成份：琼脂基础 100毫升 10%葡萄糖 2毫升

1%亚碲酸钾 4．5毫升 绵羊血 10毫升

制法：1将琼脂基础溶解好，加入羊血。

2马上加热使成咖啡色后，稍冷再加入10%葡萄糖2毫升与1%亚碲酸4．5毫升混合后倒入无菌平板，

2

凝固后存冰箱备用。

质控标准：接种白喉杆菌生长良好，其它革兰氏阴性菌均抑制生长。

用途：供培养及鉴别白喉杆菌用。

米培养基

成份：白米 20克 水 1000毫升

琼脂 20克 吐温80 10毫升

制法：1将20克米加水200毫升煮沸45分钟，煮时将容器盖好。

2用纱布过滤，只要米汤，不要饭，加水至1000毫升。

3加琼脂20克，吐温-80 10毫升煮溶，分装中型管（每管约3毫升），包扎好，高压，121℃半小时，消毒备用。

质控标准：1灭菌。

2要求清亮。

3接种白色念珠菌17-24小时生长良好，并产生厚膜孢子。

用途：培养白色念珠菌用。

蛋白胨水培养基

成份：蛋白胨 1克 氯化钠 0．5克

水加至 100毫升 PH调至 7．8

制法：把以上各物称好溶于水，调节PH7．6分装消毒备用。

质控标准：1 放置37℃无菌生长。

2 接种大肠杆菌24小时生长良好。

3 可作中国兰平板基础液。

可作靛基质基础液（作此试验需要色氨酸蛋白胨）。

血培养基

成份：蛋白胨 10克 牛肉膏 5克

氯化钠 5克 葡萄糖 3克

枸椽酸钠 3克 MgSO4。7H2O 20毫升

0．5%PABA 10毫升 酵母浸液 10毫升 0．2克（2%过滤）

*酚红0．4% 6毫升 水 1000毫升

琼脂 0．5克

*：作大BB，小BB时，不要加酚红和琼脂。

制法：1。除PABA、硫酸镁、酚红外均称好煮化调PH7．4

2。调好PH后再加酚红。

3。硫酸镁、PABA另外无菌再加入（亚细，小BB）

沙氏培养基

成份：蛋白胨 1克 水 100毫升

琼脂 1．5克（琼脂粉1克%） 葡萄糖或麦芽糖 4克

3

制法：1将上述物质称好，放入水中煮沸溶解（不必调PH即有5左右）分中号试管（约4毫升）包扎，高压115℃20分钟。

2 趁热斜好，凝固备用。

质控标准：1无菌试验合格。

2接种霉菌比在其它培养基上生长良好，其它菌生长不好。

用途：作分离培养霉菌用。

注意：1 接种临床新鲜标本可先加1-2滴70%酒精让干后再接种于含12．5%氯霉素沙氏斜面培养基上。

2 也可用蜂蜜8克代替葡萄糖或麦芽糖。

肉渣培养基

成份： 牛肉渣 牛肉浸液（牛肉膏）

制法：将做牛肉浸液的牛肉渣，装入试管，高约3毫米，加入牛肉浸液或牛肉膏汤（PH7．6）约5毫升，比肉渣高一倍，液面上加入已溶解的凡士林，高约0．5厘米（不加也可），121℃高压灭菌20-30分钟后保存于冰箱内备用 。

用途：用于厌氧菌培养。

注意：如无肉渣也可用牛、羊血等代替，将血块先放入水内煮沸，取出成小块，血块在加热后摇匀成碎颗粒状。

单糖发酵管培养基（半固体）

3 临床微生物培养基手册

成份： PH7．6-7．8蛋白胨水 1000毫升（0．3克/100毫升）

1．2%酚红液 0．4毫升

琼脂 0．4 - 0．5克

10%糖或醇 10毫升

制备：把蛋白胨水，琼脂加热溶解，然后加1．2%酚红液0．4毫升，10%糖10毫升，混匀，分装试管，每管约2-3毫升，经115℃高压灭菌20分钟后，分置于试管架上，贴上各类糖或醇类标签备用。

质控标准：细菌发酵糖类或醇而产生酸，能使培养基PH改变，指示剂由红变**，如因发酵产生气体则

半固体内产生气泡，如有动力则半固体由清亮变混浊。

明胶培养基

成份：肉浸液 1000毫升（牛肉浸膏5克）

明胶 12克

制法：

100毫升肉浸液中，加入明胶12克，隔水加热煮化，校正PH7．2，分装小号试管，用阿诺氏间歇灭菌80℃30分钟，连续3日，或者108℃高压20分钟，冷却，贮存备用。

碱性蛋白胨水

成份：

蛋白胨 20克 氯化钠 5克

硝酸钾 0．1克 结晶碳酸钠（NaclCO3．12H2O） 0．2克

水 1000毫升

4

制法：将蛋白胨，Nacl，硝酸钾，结晶碳酸钠称好，溶于1000DW中，校正PH8．4分装试管，121℃高压

灭菌15分钟后备用 。

用途：用于霍乱弧菌培养。

葡萄糖蛋白胨水（M。V用）

成份：蛋白胨 5克 葡萄糖 5克

K2HPO4 5克 水 1000毫升

制法：将上述称好溶解分装试管，调PH7．4高压灭菌115℃ 灭菌20分钟 ，或者葡萄糖加热煮沸后再倒试管

标准：灭菌试验合格。

接种大肠杆菌VP阴性，M阳性；接种产气杆菌VP阳性，M阴性。

用途：作鉴别肠道杆菌用。

枸椽酸盐培养基

成份：磷酸二氢铵 0．1克 硫酸镁 0．02克

磷酸氢二钾 0．1克 枸椽酸钠 0．23--0．5克（0．36）

氯化钠 0．5克 琼脂 1．5克

0．5%溴麝香草酚兰2毫升 （调PH6．8再加）

制法：将上述称好，放入水中煮沸溶解，调PH6．8，然后分装中号试管，高压灭菌，趁热倒呈斜面，凝固

后备用。

标准：1灭菌试验合格，培养基呈果绿色适宜。

2接种大肠杆菌，培养基上不生长，也不变色。

3接种产气杆菌，培养基呈深兰色。

用途：作鉴别大肠杆菌用。

双糖铁培养基

成份：

下层：蛋白胨 1克 氯化钠 0．5克

葡萄糖 0．2克 琼脂 0．3-0．5克

水 100毫升

将上述物质混匀调PH7．6后加1．2%酚红0．4毫升

上层：蛋白胨 1克 氯化钠 0．5克

乳糖 1克 硫代硫酸钠 0．03克

硫酸亚铁 0．02克 琼脂 1克

水 100毫升

制法： 1将下层配好，分装中号试管（1毫升），塞好包扎，15磅高压灭菌半小时，使凝固后备用。

2制上层时，先将蛋白胨水制好，加入硫酸亚铁，硫代硫酸钠，加热溶解PH8．1，再加入酚红分瓶，（每瓶300毫升，称取琼脂包扎灭菌，趁热加入乳糖隔水煮沸30分钟或112℃消毒15分钟）。

3取已制的下层管，每管用无菌法倒入上层液约1。5毫升，边斜放置使成斜面，凝固后备用。

标准：无菌试验合格，接种大肠杆菌下层产酸产气，上层产酸。

尿素培养基

成份：蛋白胨 0．1克 氯化钠 0．5克

磷酸二氢钾 0．2克 尿素 0．2克（或10%2毫升）

葡萄糖 0．01克（或10%葡萄糖0．1毫升）

H2O 100毫升 酚红（0．2%） 0．4毫升

4 临床微生物培养基手册

制法：1除葡萄糖，尿素外把其它药品称好放入水中煮沸，使溶解，调PH7．2过滤，15磅高压灭菌15分钟．

2配制尿素（灭菌）液：每100毫升基液内加2毫升．

3配制10%葡萄糖（灭菌）每100毫升加0．1毫升．

4分装小试管待用．

标准：

1灭菌试验合格．

2接种变形杆菌24小时呈红色．

用途：鉴定变形杆菌用．

胆盐中性红琼脂

成份：蛋白胨琼脂PH7．2-7．4 5000毫升

胆 盐 2．5克

乳糖 5．0克

对氨基苯甲酸 25毫克

1%中性红溶液 25毫升

制法：

将胆盐，对氨基苯甲酸，乳糖趁热加入已灭菌之蛋白胨琼脂中，待冷至50-60℃时，加入1%中性红液2．5毫升，混合后即倾注平皿，凝固待用．

*：1%中性红：1克中性红加酒精60毫升，加水40毫升

丙二酸盐培养基（缩苹果酸钠）

成份：丙二酸钠 0．3克 酵母浸膏 0．1克

Nacl 0．2克 硫酸铵 0．2克

K2HPO4 0．06克 KH2PO4 0．04克

水 100毫升

PH6．8，高压灭菌备用．

0．2%溴麝香酚兰乙醇 1．25毫升

制法：与枸椽酸盐利用试验相类似，是测定细菌能否利用丙二酸盐与碳源．无机铵盐为氨源而生长，生长者使培养基变成碱呈兰色．

鉴定： 克氏杆菌 （+） 赫夫尼亚 （+）

沙门氏菌 （—） 痢疾杆菌 （—）

苯丙氨酸培养基

成份：酵母浸液 1．5克 DL--苯丙氨酸 1克

磷酸氢二钠（无水）0．5克（或L-苯丙氨酸 0．5克）

氯化钠 2．5克 琼脂 6克

水 500毫升 PH7．4

制法：1 将上述成份加热溶解，分装于12*125mm口径的试管中，每管约4毫升．

2 高压灭菌15磅10分钟，趁热使试管斜置凝固后备用．

3 接种时划斜面．

用途：鉴定沙门氏菌用．苯丙氨酸脱氨酶试验沙门氏菌阴性．

双抗培养基

成份：

蛋白胨 10克 牛肉膏 5克

氯化钠 5克 无水亚硫酸钠 3克

柠檬酸钠 10克 蔗糖 10克

琼脂粉 20克 水 1000毫升

制法：

1将上物称好，加热溶于水中．

2调PH8．2—8．4

3 分装高压灭菌后备用．

倾注平板前先加热溶解琼脂等冷至50℃左右，按无菌操作加入多、庆抗菌素充分摇匀， 倾注平板，凝固后备用．

（庆大霉素：150u/毫升，多粘菌素：1500u/毫升, 2毫升加至1000毫升培养基内，此相当于庆大霉素0.3u/毫升, 多粘菌素3u/毫升）

O2培养基

保存液：（文—腊氏液）

A液：硼酸 12．405克 KCL 14．912克

水 1000毫升

取A液250毫升 0．8%NAOH 133．5毫升

NACL 20克 水 1000毫升

分装高压灭菌．

硝酸盐胨水

成份：

蛋白胨 1克

硝酸钾（无NO2） 0．1克

H2O 100毫升

PH7．4，高压灭菌分装备用．

（如无硝酸钾也可用硝酸钠0．02克，NACL0．05克，H2O100毫升）

用途：硝酸盐还原试验用．

原理：测定细菌能否还原硝酸盐为亚硝酸盐，后者在酸性条件下与a—萘胺和对氨基苯磺酸发生重氮反应，生成红色的1-萘-4偶氮苯对磺酸．

制法：试剂甲液A对氨基苯磺酸0．8克溶于5N的醋酸100毫升．

B：乙液a-萘酚0．5克溶于5N的醋酸100毫升中

将细菌接种于硝酸盐水中37℃培养24--96小时，加入甲液0．1毫升，再加入乙液数滴，立即呈现红或紫色为阳性

5 临床微生物培养基手册

king氏培养基（能促进绿脓菌绿色素产生）

成分：

蛋白胨 2克 K2SO4 1克

甘油 1克 MGCL2 0.14克

琼脂 1.5克 H2O 100毫升

KING氏培养基（能促进绿脓菌荧光色产生）

成分：

蛋白胨 2克 甘油 1克

K2SO4 0.15克 MGSO4 4.7克 H2O 0.15克

琼脂 1.5克 H2O 100毫升

调PH7.2 15磅20分钟消毒后使成斜面备用．

七叶苷水解试验

原理：

粪链球菌能分解七叶苷（Escalin）其代谢产物与铁离子结合产生黑色沉淀，使培养基变黑．

方法：

将菌种接种在七叶苷或琼脂上37℃18小时，观察结果，培养基变黑色，其他链球菌能生长但不变黑色，肺炎链球菌不长．

成分：

七叶苷 0.1克 胰胨 1.5克

枸橼酸铁 0.2克 琼脂 2.0克（0.5克/50毫升）

胆汁 2.5毫升 H2O 100毫升

PH7.0分装小试管内高压灭菌后备用（10磅20分钟）

七叶苷又名桑树皮甙，七叶灵，Aesclin Escnlim Bicolorin等．为白色针状结晶．水溶液兰色荧光．）

葡萄糖氧化发酵培养基（O/F）

成份：

蛋白胨 2．7克 氯化钠 5．0克

0．2%溴麝香酚兰 0．03克 琼脂 3克

KH2PO4 0．3克 葡萄糖 10．0克

水 1000毫升

制法：以上成份除糖外，溶解调PH7．0，10磅高压灭菌20分钟后备用．

方法：挑取少量培养物接种两管，其中一管接种后加液体石腊不少于1厘米厚，两管同时35℃，培养过夜，

观察颜色的变化，若无颜色变化，需继续观察七天，每日观察刺层型别．

用途：适用于微球菌科和非发酵菌的鉴定．

麦康凯培养基

成份：

蛋白胨 20克 氯化钠 5克

乳糖 10克 琼脂 20克

H2O 1000毫升 1%中性红溶液 3--4毫升

1%结晶紫 0．1毫升 PH7．4

除中性红临时用时加入外，其余均高压灭菌备用．

邻硝基酚半乳糖甙（ONPG）酶试验

缓冲液：

Na2H2PO4 6．9克 溶于40DW中，用5NNOH调PH7．0，再加水到50毫升，冰箱保存．用前若有结晶可稍加温，溶解后再用．

ONPG液：

称取ONPG（邻硝基酚--B--D半乳糖苷）80毫克，溶于15毫升D.W中，再加上缓冲液5毫升，放入冰箱中保存．此液不稳定，如出现**即不能用．

鉴别：

脑膜炎球菌和乳糖球菌及沙门氏菌属与枸橼酸菌属及亚利桑那氏菌属．

脑膜炎球菌和沙门氏菌属为阳性．

乳球菌，枸橼酸菌属和亚利桑那菌属为阳性．

半固体培养基

成份：

牛肉膏 3克 蛋白胨 10克

氯化钠 5克 琼脂 2．5--4克

水 1000毫升

校正PH7．4，15磅高压15分钟．倾注平板，厚度约4mm，冷藏备用．

氨基酸脱羟试验培养基

成份：

L-氨基酸 0．5克 蛋白胨 0．5克

牛肉膏 0．5克 葡萄糖 0．05克

吡多醛 0．5克 水 100毫升

2%溴甲酚紫乙醇液 0．5毫升 2%甲酚红 0．25毫升

制法：除指示剂及氨基酸外，溶解，PH6．0，然后加入氨基酸（必要时重新调PH）及指示剂，混匀分装1毫升/管加10毫米厚石蜡油，高压10--15磅10--15分钟灭菌备用．

6 临床微生物培养基手册

注意：

1 使用DL型AA时量加倍．

2 最好同时接种空白管（即不含有AA的同样培养基）作对照．

3 培养基超过24小时可出现阳性．

葡萄糖酸盐培养基

成份：

蛋白胨 1．5克 酵母浸液 1克

K2HPO4 1克 葡萄糖酸钾 40克

DW 1000毫升

溶解过滤分装，高压10磅15分钟．

结果：加班氏试剂，加热观察结果．

黄-橙色为阳性． 无颜色变化为阴性．

这些是我在网上摘的别人的 下面给了连接

体温计的用法

区别很大。一种是化合物，一种是金属单质，……

亚硝酸钠，是一种无机化合物，化学式为NaNO2，为白色结晶性粉末，易溶于水，微溶于乙醇、甲醇、，主要用于制造偶氮染料，也可用作织物染色的媒染剂、漂白剂、金属热处理剂。

中文名

亚硝酸钠[2]

外文名

Sodium nitrite[2]

化学式

NaNO2

分子量

68.995[2]

CAS登录号

7632-00-0

基本信息

化学式：NaNO2

分子量：68.995

CAS号：7632-00-0

EINECS号：231-555-9

理化性质

密度：1.29g/cm3

熔点：271℃

沸点：320℃

外观：白色结晶性粉末

溶解性：易溶于水，微溶于乙醇、甲醇、[1]

计算化学数据

疏水参数计算参考值（XlogP）：无

氢键供体数量：0[2]

氢键受体数量：3[2]

可旋转化学键数量：0[2]

互变异构体数量：0

拓扑分子极性表面积：52.5[2]

重原子数量：4[2]

表面电荷：0[2]

复杂度：13.5[2]

同位素原子数量：0[2]

确定原子立构中心数量：0[2]

不确定原子立构中心数量：0[2]

确定化学键立构中心数量：0[2]

不确定化学键立构中心数量：0[2]

共价键单元数量：2[1]

毒理学数据

1、急性毒性

LD50：180mg/kg（大鼠经口）[2]

LC50：5.5mg/m3（大鼠吸入，4h）[2]

2、刺激性

家兔经眼：500mg（24h），轻度刺激。[2]

3、致突变性

微生物致突变：鼠伤寒沙门菌属250μg/皿。[2]

程序外DNA合成：人Hela细胞6mmol/L。[2]

DNA抑制：人成纤维细胞2000ppm。[2]

DNA损伤：小鼠淋巴细胞105mmol/L。[2]

细胞遗传学分析：猴肝265mg/L。[2]

4、致畸性

大鼠孕后10~19d，腹腔内给予最低中毒剂量（TDLo）400mg/kg，致中枢神经系统发育畸形，血液和淋巴系统发育畸形（包括脾和骨髓）[2]。

小鼠多代经口给予最低中毒剂量（TDLo）480mg/kg，致泌尿生殖系统发育畸形。[1]

用途

主要用于制造偶氮染料，也可用作织物染色的媒染剂、漂白剂、金属热处理剂。

泄漏应急处理

隔离泄漏污染区，限制出入。建议应急处理人员戴自给式呼吸器，穿一般作业工作服。勿使泄漏物与还原剂、有机物、易燃物或金属粉末接触。不要直接接触泄漏物。

小量泄漏：用洁净的铲子收集于干燥、洁净、有盖的容器中。

大量泄漏：收集回收或运至废物处理场所处置。

急救措施

皮肤接触：脱去被污染的衣着，用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤。

眼睛接触：提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗。就医。

吸入：迅速脱离现场至空气新鲜处。保持呼吸道通畅。如呼吸困难，给输氧。如呼吸停止，立即进行人工呼吸。就医。

食入：饮足量温水，催吐。就医。

防护措施

呼吸系统防护：空气中浓度较高时，应该佩戴自吸过滤式防尘口罩。必要时，佩戴自给式呼吸器。

眼睛防护：戴化学安全防护眼镜。

身体防护：穿胶布防毒衣。

手防护：戴橡胶手套。

其他防护：工作毕，淋浴更衣。保持良好的卫生习惯。

亚硝酸钠为白色至淡**粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。

硝酸盐和亚硝酸盐广泛存在于人类环境中，是自然界中最普遍的含氮化合物。人体内硝酸盐在微生物的作用下可还原为亚硝酸盐，N-亚硝基化合物的前体物质。

外观及滋味都与食盐相似，并在工业、建筑业中广为使用，肉类制品中也允许作为发色剂限量使用。由亚硝酸盐引起食物中毒的机率较高。

病情分析：亚硝酸钠有咸味，又是被用来制食盐。亚硝酸钠暴露于空气中会与氧气反应生成硝酸钠。若加热到320℃以上则分解，生成氧气、氧化氮和氧化钠。接触有机物易燃烧爆炸。由于其具有咸味且价钱便宜，常在非法食品制作时用作食盐的不合理替代品，因为亚硝酸钠有毒，含有工业盐的食品对人体危害很大，有致癌性。

当硝酸钠被加热时，氧气被释放出来形成亚硝酸钠。硝酸钠是强酸强碱盐，水溶液是中性的；亚硝酸钠是强碱弱酸盐，水溶液是碱性的。他们两个都是是氮的价态不同，亚硝酸钠中的氮+3，硝酸钠+5。因为价不同，性质不同，用途不同。

硝酸钠与亚硝酸钠的鉴别方案

1、加热到300度,硝酸钠分解成氧气和亚硝酸钠,质量会降低.亚硝酸钠在这个温度下只熔化，不分解,质量不变.看看这个现象,称重,这是可以区分的.

2、在含有少量高锰酸钾的溶液中分别加入硝酸钠和亚硝酸钠50-80%浓硫酸中（溶液是紫色的）,亚硝酸钠会使溶液变色（高锰酸钾氧化）沉淀（二氧化锰的形成）.然而，硝酸钠与溶液没有反应,溶液的颜色不变.

3、加入硝酸钠和亚硝酸钠至大约50-80%硫酸浓度（也许30%盐酸）在里面,硝酸钠和硫酸形成的混合酸能溶解铜.亚硝酸钠和硫酸形成的酸不能溶解铜.

亚硝酸钠的应用

1、颜色保护，保持食物颜色鲜艳，食物的颜色不会变得越来越暗。用于腌制肉类食品。

2、为了抑制肉毒杆菌，并可防止新鲜肉类在空气中逐渐氧化为灰褐色变性肌红蛋白，保持肉制品鲜红。

硝酸钠的使用

搪瓷工业作为熔剂、氧化剂及制备搪瓷粉的原料。玻璃工业用作各种玻璃和产品的脱色剂、消泡剂、澄清剂和氧化剂。无机工业用作熔融烧碱的脱色剂和制造其他硝酸盐。食品工业在肉类加工中用作着色剂，它能防止肉变质，能起到调味的作用。作为酸性土壤速效肥料的化肥工业，特别适用于块根作物，像甜菜、萝卜等。染料工业用作生产苦味酸和染料的原料。冶金工业用于炼钢、铝合金热处理剂。金属清洗剂和黑色金属发蓝剂。制药工业被用作青霉素的培养基。烟草工业被用作烟草的助燃剂。分析化学用作化学试剂。此外，它也被用来制造。

钠（Natrium）是一种金属元素，元素符号是Na，英文名sodium。在周期表中位于第3周期、第ⅠA族，是碱金属元素的代表，质地柔软，能与水反应生成氢氧化钠，放出氢气，化学性质较活泼。钠元素以盐的形式广泛的分布于陆地和海洋中，钠也是人体肌肉组织和神经组织中的重要成分之一。

中文名

钠

外文名

Sodium

化学式

Na

CAS登录号

7440-23-5

EINECS登录号

231

理化性质

物理性质

钠为银白色立方体结构金属，质软而轻可用小刀切割，密度比水小，为0.968g/cm3，熔点.72℃，沸点883℃。新切面有银白色光泽，在空气中氧化转变为暗灰色。钠是热和电的良导体，具有较好的导磁性，钾钠合金（液态）是核反应堆导热剂。钠单质还具有良好的延展性，硬度也低，能够溶于汞和液态氨，溶于液氨形成蓝色溶液。在-20℃时变硬。[2]

切割金属钠

已发现的钠的同位素共有22种，包括钠-18至钠-37，其中只有钠-23是稳定的，其他同位素都带有放射性。[3]

化学性质

钠的化学性质很活泼，常温和加热时分别与氧气化合，和水剧烈反应，量大时发生爆炸。钠还能在二氧化碳中燃烧，和低元醇反应产生氢气，和电离能力很弱的液氨也能反应，具有抗腐蚀性。

钠原子的最外层只有1个电子，很容易失去，所以有强还原性。因此，钠的化学性质非常活泼，能够和大量无机物，绝大部分非金属单质反应和大部分有机物反应，在与其他物质发生氧化还原反应时，作还原剂，都是由0价升为+1价（由于ns1电子对），通常以离子键和共价键形式结合。金属性强，其离子氧化性弱。[4]

钠与水反应

工业用途

测定有机物中的氯。还原和氢化有机化合物。检验有机物中的氮、硫、氟。去除有机溶剂（苯、烃、醚）中的水分。除去烃中的氧、碘或氢碘酸等杂质。制备钠汞齐、醇化钠、纯氢氧化钠、过氧化钠、氨基钠、合金、钠灯、光电池，制取活泼金属。

生理作用

钠是人体中一种重要无机元素，一般情况下，成人体内钠含量大约为3200（女）～4170（男）mmol，约占体重的0.15%，体内钠主要在细胞外液，占总体钠的44%～50%，骨骼中含量占40%～47%，细胞内液含量较低，仅占9%～10%。

1、钠是细胞外液中带正电的主要离子，参与水的代谢，保证体内水的平衡，调节体内水分与渗透压。

2、维持体内酸和碱的平衡。

3、是胰液、胆汁、汗和泪水的组成成分。

4、钠对ATP（腺嘌呤核苷三磷酸）的生产和利用、肌肉运动、心血管功能、能量代谢都有关系，此外，糖代谢、氧的利用也需有钠的参与。

5、维持血压正常。

6、增强神经肌肉兴奋性。

人体钠的主要来源为食物。钠在小肠上部吸收，吸收率极高，几乎可全部被吸收，故粪便中含钠量很少。钠在空肠的吸收大多是被动性的，在回肠则大部分是主动的吸收。钠与钙在肾小管内的重吸收过程发生竞争，故钠摄入量高时，会相应减少钙的重吸收，而增加尿钙排泄。因尿钙丢失约为钙潴留的50%，故高钠膳食对钙丢失有很大影响。

高温、重体力劳动、经常出汗的人需要注意补充钠（饮用淡盐水等）。

钠普遍存在于各种食物中，一般动物性食物高于植物性食物，但人体钠来源主要为食盐、以及加工、制备食物过程中加入的钠或含钠的复合物（如谷氨酸、小苏打等），以及酱油、盐渍或腌制肉或烟熏食品、酱咸菜类、发酵豆制品、咸味休闲食品等。

人体内钠在一般情况下不易缺乏、但在某些情况下，如禁食、少食，膳食钠限制过严而摄入非常低时，或在高温、重体力劳动、过量出汗、肠胃疾病、反复呕吐、腹泻使钠过量排出而丢失时，或某些疾病，如艾迪生病引起肾不能有效保留钠时，胃肠外营养缺钠或低钠时，利尿剂的使用而抑制肾小管重吸收钠时均可引起钠缺乏。钠的缺乏在早期症状不明显，倦怠、淡漠、无神、甚至起立时昏倒。失钠达0.5g/kg体重以上时，可出现恶心、呕吐、血压下降、痛性肌痉挛，尿中无氯化物检出。

正常情况下，钠摄入过多并不蓄积，但某些特殊情况下，如误将食盐当食糖加入婴儿奶粉中喂养，则可引起中毒甚至死亡。急性中毒，可出现水肿、血压上升、血浆胆固醇升高、脂肪清除率降低、胃黏膜上皮细胞受损等。钠的适宜摄入量（AI）成人为2200mg/d。

储存方法

浸放于液体石蜡、矿物油和苯系物中密封保存，大量通常储存在铁桶中充氩气密封保存。金属钠不能保存在煤油中是因为与煤油中的有机酸等物质反应成有机酸钠等物质（呈**）附着在钠表面[4]。当保存在石蜡油中时，空气中的氧气也会进入石蜡油，使金属钠的表面变灰，形成氧化物膜。

怎样防治黑斑病甘薯中毒？

常用的有水银温度计，首先说一下怎么读数。手拿住水银体温计尾部，使眼与体温计保持同一水平，然后慢慢地转动体温计，从正面看到很粗的水银柱(中间红色那根线)就可读出相应的温度值。读数时注意千万不要用手碰体温计的水银端，这样会影响水银柱而造成测量不准。每次看之前一定要拿住尾部先甩一甩，确保不是之前的读数。

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使用方法

测量口温：

(1)使用前先将温度计度数甩到35℃以下。

(2)将体温计放在舌下(含住即可、不可用力咬及说话)。

(3)至少量3-5分钟，7分钟最佳。

(4)取出体温计，读取温度数据后，用卫生纸擦拭干净，再以酒精棉片消毒(以旋转方式自尾端擦至水银端)。

温馨提示：

(1)婴幼儿、呼吸困难、意识不清者、有痉挛病史及无法合作者请勿量口温。

(2)30分钟内不可吃东西和进行剧烈运动。

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测量腋温：

(1)使用前要先将温度计度数甩到35℃以下。

(2)测量前不要洗澡，先檫去腋窝的汗，把体温表的水银端夹在腋窝中间，注意不要把表头伸到外面，如果是小孩的话注意扶住其胳膊以防移动。

(3)测量5-10分钟。

(4)取出体温计，读取温度数据后，用卫生纸擦拭体温计。

温馨提示：

(1)时间未到就拿掉或者不小心移动了的，需重新测量，时间需重新计算。

(2)喝热饮、剧烈运动、情绪激动及洗澡需待30分钟后再测量。

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测量肛温：

(1)婴儿仰卧抬腿或趴卧姿势，儿童及成人侧卧姿势。

(2)使用前要先将温度计度数甩到35℃以下。以润滑剂(凡士林或石蜡油)润滑肛表水银球端。

(3)手扳开肛门，将肛表旋转并缓慢轻轻插入，拿肛表之手同时靠於臀部固定以防滑落或插太深。

(4)插入深度：婴儿1.25公分;儿童2.5公分;成人3.5公分

(5)测量2-5分钟。

(6)取出肛表，读取温度数后，以卫生纸擦拭干净，再以酒精棉片消毒(以旋转方式自尾端擦至水银端)。

温馨提示：

(1)腹泻者及直肠疾患、手术者禁量肛温。

(2)喝热饮、剧烈运动、情绪激动及洗澡需待30分钟后再测量。

(3)肛温是最接近人体温度的，并且受环境温度影响最小，但不方便测量，不适合作筛检用。因此这种方法只有用在需要对其他测量方法进行确认的基础上。

(4)先用卫生纸将体温计擦拭干净，再读取温度数据。

其实，口温和肛温是比较接近人体温度的，只不过这些都有一定的会用限制，比如婴儿和正在长牙齿的小朋友就不适合用体温计量口温，自然“大孩子们”也就不适合量肛温了。

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电子体温计。它能快速准确地测量人体温度，与传统的水银玻璃体温计相比，具有读数方便、测量时间短、测量精度高、能记忆并有蜂鸣提示的优点，尤其是电子体温计不含水银，对人体及周围环境无害，特别适合于学校家庭、医院等场合使用。

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使用方法：

1.按下在显示屏旁边的ON/OFF按钮，显示屏将显示提示;约2秒钟，同时可以听到哔的声音；

2.松开ON/OFF按钮，显示屏显示上一次测量的温度值约2秒，之后显示标准温度37.0℃，接着显示Lo℃，开始进入测温状态；当测量到的温度超过32.0℃，体温计将不再显示Lo℃，开始显示测量到的温度值；

3.用医用酒精对感温头(商标以下部位)进行消毒，然后把感温头放置到测温的位置（口腔，腋窝，等等）；

4.每次测量通常约需60秒钟左右，感温头的温度方可达到稳定，显示屏的℃符号便停止闪烁，温度稳定约15秒后，可听到哔－哔－哔－；声响，表示测温完成；取出体温计后，温度读数将会保持一直不变；

5.如果经测量体温超过37.8℃，将发出发烧提示；哔哔哔－哔哔哔；约10秒；

6.测量完成后，体温计会自动在8分40秒后切断电源。为延长电池使用寿命，建议在测完体温并记录好后，按下ON/OFF按钮切断电源；

7.请依照相关法律要求妥善处理使用过的废电池和体温计。

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红外线耳温计。是一种专门用于测量鼓膜温度的温度计，通过红外导波管将主要由鼓膜发射的红外辐射能传送到热电堆等热探测器，将红外辐射能量转换为电能后进行电信号处理得到人体温度信息。

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使用方法：

1.按下电源/记忆键，显示屏全显，之后显示前一次测温记录，再显示预备符。

2.测量耳温：轻拉耳廓，使耳道变直，保持水平。固定头部，将探测器的前端插入耳孔并对准耳膜成一条直线。

3.按下测量键，听到“哔”一声之后，测量完成。这时可拿起耳温计读取上面的温度数值。

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柠檬酸到底是什么

黑斑病甘薯中毒是因为奶牛食了发生黑斑病的甘薯而中毒，黑斑病甘薯会产生甘薯酮、甘薯醇、甘薯宁等毒素，奶牛食后会发生呼吸困难和急性肺部水肿、气肿等。

症状

奶牛食甘薯后中毒，呼吸困难，严重气喘，呼吸增数，可达100次/分钟，体温正常，肺部听诊，呼吸音粗厉，头颈伸直，张口呼吸，并发出吭吭声。奶牛反刍停止，食欲废绝，粪便干硬，带有黏液和血液。少数病牛发病不久，则在颈部，肩部和背肋部出现皮下气肿，触诊有捻发音。严重病例，会出现窒息死亡。

治疗

（1）停止饲喂黑斑病甘薯，对病牛用0.1%高锰酸钾洗胃。

（2）灌服活性炭100克、硫酸镁300克和石蜡油500毫升，加水1000毫升一次灌服，以吸附和排出毒素。

（3）10%硫代硫酸钠200毫升，维生素C50毫升静注，缓解呼吸困难。

（4）严重呼吸困难时可输氧或用3%双氧水100毫升加到500毫升糖盐水中缓慢静注。

（5）静脉注射10%安钠咖30毫升、50%葡萄糖500毫升，缓解肺水肿。

PCR扩不出来，紧急求助

简介柠檬酸，又称枸橼酸，学名2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸，化学式为C6H8O7，是一种重要的有机酸，为无色半透明晶体或白色颗粒或白色结晶性粉末，无臭、味极酸，在潮湿的空气中微有潮解性。

柠檬酸在食品和医学上用作多价螯合剂，也是化学中间体，用于汽水、糖果等，也用作金属清洁剂，媒染剂等。

柠檬酸广泛分布于植物界中，如在柠檬、醋栗、覆盆子、葡萄汁等中，可从植物原料中提取，也可由糖进行柠檬酸发酵制得。

由于柠檬酸具刺激作用，接触者可能引起。

柠檬酸粉体与空气可形成性混合物，遇明火、高热或与氧化剂接触，有引起燃烧的危险。

天然分布天然柠檬酸在柠檬中含量较高天然柠檬酸在自然界中分布很广，天然的柠檬酸存在于植物如柠檬、柑橘、菠萝等果实和动物的骨骼、肌肉、血液中。

很多种水果和蔬菜，尤其是柑橘属的水果中都含有较多的柠檬酸，特别是柠檬和青柠——它们含有大量柠檬酸，在干燥之后，含量可达8%（在果汁中的含量大约为47g/L）。

在柑橘属水果中，柠檬酸的含量介于橙和葡萄的0.005mol/L和柠檬和青柠的0.30mol/L之间。

这个含量随着不同的栽培种和植物的生长情况而有所变化。

物理性质外观一水柠檬酸晶体

柠檬酸为无色半透明晶体，或白色颗粒，或白色结晶性粉末，无臭，虽有强烈酸味但令人愉快，稍有一点后涩味。

它在温暖空气中渐渐风化，在潮湿空气中微有潮解性。

溶解性溶于水、乙醇、，不溶于苯，微溶于氯仿，水溶液显酸性。

柠檬酸其钙盐在冷水中比热水中易溶解，此性质常用来鉴定和分离柠檬酸。

结晶形式柠檬酸立体分子结构

柠檬酸结晶形态因结晶条件不同而不同，有无水柠檬酸C6

H8O7，也有含结晶水的柠檬酸2C6H8O7·H2O、C6H8O7·H2O或C6H8O7·2H2O。

结晶时控制适宜的温度可获得无水柠檬酸。

商品柠檬酸主要是无水柠檬酸和一水柠檬酸。

一水柠檬酸是由低温（低于36.6℃）水溶液中结晶析出，经分离干燥后的产品，分子量210.14，含结晶水量为8.58%，熔点70～75℃，密度=1.542。

20℃下，100中可溶解无水物147g。

放置在干燥空气中时，处于晶体晶格中的结晶水逸出而风化。

一水柠檬酸晶体缓慢加热时，先在50～70℃开始失水，70～75℃晶体软化，开始熔化。

加热到130℃时完全丧失结晶水，最后在135～152℃范围内完全熔化。

一水柠檬酸剧烈加热时，在100℃熔化，结块变为无水柠檬酸，继续加热很精确地在153℃熔化。

一水柠檬酸晶体为斜方棱晶，晶体较大。

无水柠檬酸是由高温（高于36.6℃）水溶液中结晶析出的。

一水柠檬酸转变为无水柠檬酸的临界温度为36.6±0.15℃。

无水柠檬酸分子量192.14，熔点153℃。

无水柠檬酸晶体形态为单斜晶系的棱形-双菱锥体。

化学性质汉斯·阿道夫·克雷布斯从结构上讲柠檬酸是一种三羧酸类化合物，并因此而与其他羧酸有相似的物理和化学性质。

加热至175°C时它会分解产生二氧化碳和水，剩余一些白色晶体。

柠檬酸是一种较强的有机酸，有3个H

可以电离；加热可以分解成多种产物，与酸、碱、甘油等发生反应。

柠檬酸是在生物化学上将脂肪、蛋白质和糖转化为二氧化碳的过程中的重要化合物。

这些化学反应是几乎所有代谢的核心反应，并且为高等生物能量。

汉斯·阿道夫·克雷布斯因为发现这一系列反应获得了1953年诺贝尔生理学或医学奖。

这一系列反应称作“柠檬酸循环”、“三羧酸循环”或“克氏循环”。

主要用途柠檬酸是有机酸中第一大酸，由于物理性能、化学性能、衍生物的性能，是广泛应用于食品、医药、日化等行业最重要的有机酸。

广泛用作食品、饮料的酸味剂和剂。

亦可用作化妆品、金属清洗剂、媒染剂、无毒增塑剂和锅炉防垢剂的原料和剂。

其主要盐类产品有柠檬酸钠、钙和铵盐等,柠檬酸钠是血液抗凝剂,柠檬酸铁铵可作补血。

用于食品工业柠檬酸被普遍用于糖果和饮料的生产因为柠檬酸有温和爽快的酸味，普遍用于各种饮料、汽水、葡萄酒、糖果、点心、饼干、罐头果汁、制品等食品的。

在所有有机酸的市场中，柠檬酸市场占有率70%以上。

一分子结晶水柠檬酸主要用作清凉饮料、果汁、果酱、水果糖和罐头等的酸性调味剂，也可用作食用油的抗氧化剂

用于化工柠檬酸用作化学试剂柠檬酸在化学技术上可作化学分析用试剂，用作实验试剂、色谱分析试剂及生化试剂；用作络合剂，掩蔽剂；用以配制缓冲溶液。

用于纺织业用柠檬酸或柠檬酸盐类作助洗剂，可改善洗涤产品的性能，可以迅速和沉淀金属离子，防止污染物重新附着在织物上，保持洗涤必要的碱性；使污垢和灰分散和悬浮；提高表面活性剂的性能，是一种优良的鳌合剂。

工业用的柠檬酸，在化学技术上可作化学分析用试剂，服装的甲醛污染已是很敏感的问题，柠檬酸和改性柠檬酸可制成一种无甲醛防皱整理剂，用于纯棉织物的防皱整理。

不仅防皱效果好，而且成本低。

用于环保柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液用于烟气脱硫。

柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液由于其蒸气压低、无毒、化学性质稳定、对SO2吸收率高等原因，是极具开发价值的脱硫吸收剂。

用于禽畜生产在仔猪饲料中柠檬酸，可以提早断奶，提高饲料利用率5％～10％，增加母猪产仔量。

在生长育肥猪日粮中1％～2％柠檬酸，可提高日增重，降低料肉比，提高蛋白质消化率，降低背脂厚度，改善肉质和胴体特性。

柠檬酸稀土是一种新型高效饲料剂，适用于猪、鸡、鱼、虾、牛、羊、兔、蚕等各种动物，具有促进动物生长，改善产品品质，提高抗病能力及成活率，提高饲料转化率，缩短饲喂周期等特点。

用于化妆品柠檬酸属于果酸的一种，主要作用是加快角质更新，常用于液、霜、洗发精、美白用品、抗老化用品、青春痘用品等。

角质的更新有助于皮肤的中黑色素的剥落，毛孔的收细，黑头的溶解等。

用于柠檬酸与80℃温度联合作用具有良好杀灭细菌芽孢的作用，并可有效杀灭血液透析机管路中污染的细菌芽孢。

享有“西餐之王”美誉的柠檬具有很强的作用，对食品卫生很有好处，再加上柠檬的清香气味，人们历来喜欢用其凉菜，不仅美味爽口，也能增进食欲。

用于医药柠檬酸具有收缩、增固毛细血管并降低其通透性的作用，还能提高凝血功能及血小板数量，缩短凝血时间和出血时间，具有一定的止血作用。

制药工业用作医药清凉剂，测血钾。

食用注意作为食品剂柠檬酸为食用酸类，可增强体内正常代谢，适当的剂量对人体无害。

在某些食品中加入柠檬酸后口感好，并可促进食欲。

虽然柠檬酸对人体无直接危害，但它可以促进体内钙的排泄和沉积，如长期食用含柠檬酸的食品，有可能导致低钙血症。

儿童表现有神经系统不稳定、易兴奋、植物神经紊乱；大人则为手足抽搐、肌肉痉挛，感觉异常，瘙痒及消化道症状等。

如果误食工业柠檬酸浸泡的食品，食品中的化学残留会损害神经系统，诱发过敏性疾病，甚至致癌。

饮料或食物中含有的食用柠檬酸极少量，基本对人体无害。

生产简史世界生产史贾比尔·伊本·哈扬柠檬酸的发现始于8世纪伊朗炼金术士贾比尔。

1784年，C.W.舍勒首次从柠檬汁中结晶分离出柠檬酸。

1890年，意大利柠檬汁工厂开启了柠檬酸的工业。

1893年，C.韦默尔发现青霉菌可以以糖类为原料柠檬酸。

1917年，美国食物化学家詹姆斯·柯里发现某些类型的黑曲霉可以高效地柠檬酸。

两年后，辉瑞利用这一技术开始进行柠檬酸的。

1923年美国菲泽公司建造了世界上第一家以黑曲霉浅盘发酵法生产柠檬酸的工厂。

1950年前，柠檬酸用浅盘发酵法生产。

1952年美国迈尔斯试验室用深层发酵法大规模生产柠檬酸。

此后，深层发酵法逐渐建立起来。

深层发酵周期短，产率高，节省劳动力，占地面积小，便于实现仪表控制和连续化，成为柠檬酸生产的主要方法。

中国发展柠檬酸1942年，汤腾汉用发酵法柠檬酸是为中国最早记录。

1952年，陈声等开始用黑曲霉浅盘发酵柠檬酸。

1966年，天津市工业微生物研究所、上海市工业微生物研究所相继开展用黑曲霉进行薯干粉原料深层发酵柠檬酸的试验研究，并获得成功，从而确定了中国柠檬酸生产的这一主要工艺路线。

薯干粉深层发酵柠檬酸，原料丰富，工艺简单，不需营养盐，产率高，是中国独特的先进工艺。

10年，天津、上海、沈阳、常州等地研究单位利用解脂丝酵母(candida

lipolytica)进行石蜡油（正构烷烃）发酵生产柠檬酸的试验。

19年徐子渊等筛选出一株对氟乙酸敏感的变异株解脂丝酵母，其乌头酸水合酶的活性很低，柠檬酸的生成比例从原来的50％提高至80％，从而提高了石油发酵柠檬酸的产率。

生产方法柠檬酸发酵工艺

柠檬酸生产工艺分为水果提取法，化学法和生物发酵法三种。

水果提取法柠檬酸从柠檬、橘子、苹果等柠檬酸含量较高的水果中提取。

此法提取的成本较高，不利于工业化生产。

化学法这种方法的是以，二氯或乙烯酮的为原料的化学。

此法工艺复杂，成本高，安全性低。

生物发酵法将黑曲霉被放入含有蔗糖或葡萄糖的培养基中进行培养，以生产柠檬酸。

糖类的来源包括玉米浆、糖蜜发酵液、玉米粉的水解产物或其他廉价的糖类溶液。

在去除霉菌之后，向剩余的溶液中加入氢氧化钙，使柠檬酸反应生成柠檬酸钙沉淀，分离出沉淀之后再加入硫酸就可以得到柠檬酸。

国家标准基本信息标准号StandardNo：GB/T8269-2006中文标准名称StandardTitleinChinese：柠檬酸英文标准名称：Citricacid发布日期IssuanceDate：2006-7-18实施日期ExecuteDate：2006-12-1首次发布日期FirstIssuanceDate：1987-10-19标准状态StandardState：现行复审确认日期ReviewAffirmanceDate：编号PlanNo：20031594-T-607代替国标号ReplacedStandard：GB/T8269-1998被代替国标号ReplacedStandard:废止时间RevocatoryDate：用国际标准号AdoptedInternationalStandardNo：BP-98,USP-27标名称AdoptedInternationalStandardName：英国药典，美国药典用程度ApplicationDegree：NEQ用国际标准AdoptedInternationalStandard：国外先进标准国际标准分类号（ICS）：67.220.10中国标准分类号（CCS）：X69标准类别StandardSort：产品标准页NumberofPages:标准价格（元）Price（￥）：主管部门Governor：国家标准化管理委员会归口单位TechnicalCommittees：全国食品工业标准化技术委员会起草单位DraftingCommittee：安徽丰原生化公司、山东日照泰山洁晶生化公司、江苏宜兴协联生化公司、中国食品发酵工业研究院范围本标准规定了柠檬酸的化学名称、分子式、结构式和相对分子质量、产品分类、要求、分析方法、检验规则、标志、包装、运输和贮存。

本标准适用于由淀粉或糖质原料发酵制得的柠檬酸产品。

规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。

凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可适用这些文件的最新版本。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T191包装储运图示标志（GB/T191-2000,eqvISO780:19）GB/T601化学试剂滴定溶液的GB/T602化学试剂杂质测定用标准溶液的GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的GB/T606化学试剂水分测定通用方法卡尔.费休法GB/T5009.11-2003食品中总砷及无机砷的测定GB/T6682-1992分析实验室用水规格和试验方法（neqISO3696：1987）GB/T50073-2001洁净厂房设计规范环境措施凡在中国境内从事柠檬酸生产的企业，必须建设与生产规模相适应的环保治理设施，主要污染物排放必须达到国家规定的排放标准，对不达标的企业按照有关环境保律进行停产或限产治理并予处罚。

柠檬酸行业执行《污水综合排放标准》和《大气污染综合排放标准》中相关的标准。

根据实际情况，要求企业排放的主要污染物（即水中的COD和废气中的烟尘、二氧化硫）达到国家规定的排放标准。

高浓度柠檬酸废水经过厌氧处理后，与低浓度有机废水混合进入接触氧化池，再进入气浮系统，最终出水COD要满足《污水综合排放标准》中新扩改企业发酵行业二级标准（COD≤300mg/L、SS≤200mg/L、pH=6～9）.

我认为，“溴酚蓝带（约300bp）前后各有一条带，且两条带亮度差不多”，而“阴性对照（没加模板）只在溴酚蓝带后有一条带”。可以用实验组和阴性对照组比较，若两者溴酚蓝带后的带位置一直，那么应该是引物二聚体。

至于PCR，应从很多方面考虑，我有一个优化的方法：

PCR必需具备下述基本条件：模板核酸（DNA或RNA）、人工合成的寡核苷酸引物、合适的缓冲体系、合适的Mg2+浓度、三磷酸脱氧核苷酸、耐热DNA聚合酶、温度循环参数、其它因素如二甲基亚砜、甘油、石蜡油、明胶等。

1．引物

PCR扩增产物的大小是由特异引物限定的，因此引物的设计与合成对PCR的成功与否有着决定性的意义。

l引物合成的质量：合成的引物必须经聚丙烯酰胺凝胶电泳或反向高压液相层析（HPLC）纯化。因为合成的引物中会有相当数量的“错误序列”，其中包括不完整的序列和脱嘌吟产物以及可检测到的碱基修饰的完整链和高分子量产物。这些序列可导致非特异扩增和信号强度的降低。引物不用时应存于–20℃保存。引物的设计原则：见引物的设计

l引物的用量：一般PCR反应中引物的终浓度为0.1~1umol/L，引物浓度过低则产物量降低；引物浓度过高会促进非特异产物合成，还会增加引物二聚体的形成，它们与靶序列竞争DNA聚合酶和dNTP,从而使靶序列的扩增量降低。

2．缓冲液

目前最为常用的缓冲体系为10~50mmol/L。Tris是一种双极性离子缓冲液，20℃时其pKa值为8.3,△pKa值为–0.021/℃。因此,20 mmol/L Tris–HCI(pH8.3,20℃)在实际PCR中,pH变化于6.8~7.8之间。改变反应液的缓冲能力,如将Tris浓度加大到50mmol/L, pH8.9,有时会增加产量。反应混合液中50mmol/L以内的KCl有利于引物的退火, 50mmol/L NaCl或50mmol/L以上的KCl则抑制Taq DNA聚合酶的活性。有些反应液中以NH4+代K+,其浓度为16.6mmol/L。反应中加入小牛血清白蛋白(100μg/ml)或明胶(0.01%)或Tween20(0.05%~0.1%)有助于酶的稳定,反应中加入5 mmol/L的二巯苏糖醇(DTT)也有类似作用,尤其在扩增长片段(此时延伸时间长)时,加入这些酶保护剂对PCR反应是有利的。

3.Mg2+

lMg2+是Taq DNA聚合酶活性所必需的，也影响着引物的退火，模板与PCR产物的解链温度，产物的特异性，引物二聚体的形成等。Mg2+浓度过低时，酶活力显著降低；过高时，则酶催化非特异的扩增。

lPCR混合物中的DNA模板、引物和dNTP的磷酸基因均可与Mg2+结合，降低Mg2+浓度，而Taq DNA聚合酶需要的是游离Mg2+。因此，PCR中Mg2+的加入量要比dNTP浓度高0.2~2.5m mol/L。最好对每种模板,每种引物均进行Mg2+浓度的优化。另外还需注意引物和模板DNA原液中如含EDTA等螯合剂也会影响游离Mg2+浓度。

l优化Mg2+浓度法:首先须知模板DNA,引物和dNTP浓度和设定的PCR循环参数。反应中的PCR缓冲液中不加Mg2+。Mg2+是从10mmol/L MgCl贮存液中逐一加入反应管中。开始以0.5mmol/L递增(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5~5.0mmol/L)，在确定了Mg2+大概浓度以后，再在该浓度上下，以0.2 m mol/L递增和递减几个浓度来精确确定Mg2+的最适浓度。

4．三磷酸脱氧核苷酸

0?2?0?2 l贮备dNTP液应用NaOH调pH至中性，其浓度用分光光度计测定。贮备液为5~10 mmol/L，分装后–20℃保存。在PCR的重复热循环过程中其热稳定性应为：50循环后约有50%仍为dNTP。

l 反应中每种dNTP（dATP，dGTP，dTTP和dCTP）的终浓度为20―200umol/L,在此范围中，PCR产物量、特异性合成和忠实性间的平衡最佳。所用的四种dNTP终浓度应相等，以使错误掺入率降至最低。最低的适宜dNTP浓度可根据特定靶序列长度和碱基组成来确定。保持四种dNTP的浓度均在10~15umol/L以上，对保持碱基掺入的忠实性是很重要的。dNTP终浓度大于50 mmol/L时会抑制Taq DNA聚合酶活性。

ldNTP的类似物也可掺入PCR产物。

5．耐热DNA聚合酶

l自从耐热Taq DNA聚合酶引入PCR后，又有多种耐热DNA聚合酶（VENT和Tth等）相继用于PCR。目前仍以Taq DNA聚合酶应用较多。不同来源聚合酶制备条件、测定方法和（或）单位定义有所不同，使用时需加以注意。

l酶的需要量可根据不同的模板分子或引物而变化。当优化PCR时，最好在每100μ1反应体积中加入0.5~5U酶的范围内试验最佳酶浓度。如果酶浓度太高，则琼脂糖凝胶电泳中会出现非特异扩增带；过低时，则靶序列产量很低。

lPCR后可通过下述方式之一灭活Taq DNA聚合酶：（1）99~100℃加热10min；(2)加入EDTA-Na至10mmol/L螯合Mg2+；（3）酚一氯仿抽提、乙醇沉淀PCR产物。

6．温度循环参数

①变性温度与时间：PCR的变性一步很重要，此步若不能使靶基因模板和（或）PCR产物完全变性，变会导致PCR失败。典型的变性条件是95℃30s或℃30s，更高的温度可能更有效，尤其是对富含G+C的靶基因。DNA在其链分离温度（strand separation temperature,Tss）时的变性只需几秒钟，然而反应管内部达到Tss还需一定时间。变性温度太高会影响酶活性。最简单的方法是在加Taq聚合酶前选使模板在先℃变性lmin，对PCR的成功亦有益处。环状质粒DNA模板最好酶切线性化，因环状DNA复性极快。在扩增短片段（100~300bp）时，可用简便、快速的两步PCR法，同时在5~10个循环后，将变性温度降至87~90℃可改善PCR产量。具体降低程度则根据具体反应和使用的PCR仪而定。

②复性温度与时间：如果说变性温度对PCR反应的成败是关键，那么复性温度则决定着PCR的特异性。引物复性所需的温度与时间取决于引物的碱基组成、长度和浓度。合适的复性温度应低于扩增引物在PCR条件下真实Tm值的5℃。根据下式计算最适复性温度（Tm）有助于PCR的成功。

另一种更简便的方法是通过引物的有效长度(Ln)来估算。在此，还需引入另一概念，即有效启动温度（effective priming temperature Tp）。Tp是最佳引物介导扩增发生时的最高温度。Tp在一定范围（20~35个核苷酸）内与Ln呈直线相关。Lp=22+1.45(Ln):其中Ln=2（G+C）+（A+T）最适复性温度为Tp±2~5℃。Tp值较引物模板的Tss值高5~10℃，这是因引物复性后，DNA聚合酶很快发生聚合反应，在引物3’端加上数个碱基使引物–模板更稳定，易于在较高温度下发生延伸。研究表明，引物的复性是受动力因素控制的，而不是受热力学参数控制的。它取决于引物解离与延伸效率间的平衡。Tp仅是PCR的最适复性温度，也是PCR最佳特异性温度，在等位基因特异PCR（AS–PCR）时决定Tp很重要。Tp值基本上不受Mg2+浓度影响，当Mg2+由1.5mmol/L升至10 mmol/L时，Tp才升高3℃。确定了复性温度后，复性时间并不是关键因素。但复性时间太长会增加非特异的复性。复性时间也不能太短（≥30s），如用手控温度反应，复性状态的时间不能太长，耽搁过长会增加非特异复性。

③延伸温度与时间

引物延伸温度一般为72℃（较复性温度高10℃左右）。不合适的延伸温度不仅会影响扩增产物的特异性，也会影响其产量。72℃时，核苷酸的掺入率为每秒35~100个核苷酸,这取决于缓冲体系、pH、盐浓度和DNA模板的性质。72℃延伸1min对于长达2kb的扩增片段是足够的。然而，延伸时间决定于靶序列的长度与浓度。3~4 kb的靶序列需3~4 min延伸，延伸时间过长会导致非特异扩增带的出现。PCR中前几个循环延伸时间应足够长以使靶序列延伸完全，对很低浓度底物的扩增延伸时间要长些。

④循环数

循环数决定着扩增程度。在其它参数都已优化条件下，最适循环数取决于靶序列的初始浓度。过多的循环会增加非特异扩增产物的数量和复杂性（见平台效应）。当然，循环数太少，PCR产量就会极低。在初始靶序列为3X105，1.5X104，1X103和50拷贝分子时，其循环数可分别为25~30，30~35，35~40和40~45个循环。

除循环数外，扩增效率也决定扩增程度的重要因素。实验表明，以染色体DNA为模板时，第25~30个循环过程中，扩增DNA明显增加。扩增程度（Y）、起始DNA量（A）、扩增效率（R）和循环数（n）间的关系为：Y=A（I+R）n效率为100%时，25个循环后，Y=225·A=33 554 432A，而效率R=90%，n=25时，Y=1.925=9 307 649A，扩增产物减少了72%，由此可见扩增效率对扩增程度的影响。

⑤其它因素

高温起动（hot start）：由于Taq DNA聚合酶低温下仍具有活性。因此在一般PCR反应的开始加热变性DNA后再加酶的过程中，引物可与模板发生非特异复性，这些非特异复性在达到72℃前就由Taq 聚合酶在其3'端聚合上几个碱基并稳定了这种非特异复性引物。因此，可出现非特异延伸和扩增。用高温起动法便可克服这一缺点，即使Taq聚合酶仅在反应达到较高温度（>70℃）时才发挥作用。这可通过在高温（>70℃）下加入某些必需因子（DNA聚合酶，模板DNA，Mg2+或引物等）来控制。这种方法不仅可增加PCR的特异性，还能增加其敏感性，并可减少引物二聚体的形成和引物的自我复性。这是因为在扩增前加热可促进引物的特异复性与延伸，因此增加了有效引物的长度。

7．PCR促进剂：

1．二甲基亚砜（DMSO）：许多耐热DNA聚合酶厂定推荐在PCR反应中加入10%DMSO，这可能是DMSO有变性DNA的作用。DMSO的使用对大肠杆菌DNA聚合酶I K1enow片段是有益的，但对Taq DNA聚合酶有抑制作用，一般反应中应尽量不用DMSO。不过，在复合PCR中可以用。

2．甘油：有报道，反应中加入5%~20%甘油有助于PCR反应的复性过程，尤其对G+C含量高和二级结构多的靶序列以及扩增长片段（>1.5kbp）更适用。

3．氯化四甲基铵（TMAC）：在反应中加入1X10–4~1X10–5mol/L的TMAC可促进PCR，去除非特异扩增，而不抑制Taq聚合酶。

4．T噬菌体基因32蛋白质（gp32）：加入0.5~1μl的gp32（lnmol/L, PHarmacia）可使Taq聚合酶对长片段DNA的扩增改善至少10倍。

5．石蜡油：反应中所用石蜡油质量要高，不能含抑制Taq DNA聚合酶活性的杂质。加石蜡油目的是防止反应液蒸发后引起的冷却与反应成分的改变。石蜡油的有无对反应影响较大。但现在PE–Cetus公司又研制了一种新型PCR仪–9600型基因扩增PCR系统，免除了加石蜡油的步骤。

希望对你有用。